猴颗粒酶B(GzmB)ELISA试剂盒

猴颗粒酶B(GzmB)ELISA试剂盒 

仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

产品规格：96T/48T（可拆）

产品数量：咨询

产品应用：ELISA实验

产品货期：现货

有效期：6个月

保存条件：2-8℃

实验原理

1. 抗原抗体反应

ELISA试剂盒中的抗原或抗体被固定在固相载体上，当加入待测样本时，样本中的抗原或抗体与固相载体上的抗原或抗体发生反应，形成抗原抗体复合物。

2. 酶标记物的结合

将酶标记物与特异性抗体或抗原结合，形成酶标记抗体或抗原。酶标记物在反应中起到催化作用，加速反应进程，提高检测灵敏度。

3. 酶促反应

在酶标记物与抗原抗体复合物结合后，加入底物溶液，底物在酶的催化下发生氧化还原反应，产生颜色变化。颜色深浅与待测样本中的抗原或抗体浓度成正比。

4. 吸光度检测

将反应体系中的吸光度进行测量，通过比较标准品溶液与待测样本溶液的吸光度值，即可计算出待测样本中的抗原或抗体浓度。

标本的稀释原则

      首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。计算浓度时，稀释了“N"倍，标本的浓度应再乘以“N"。 

标准品的稀释原则

      2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品xi释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 

生物su标记抗体的稀释原则

       临用前以生物su标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物su标记抗体加990μl生物su标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 

辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则

       临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 

猴颗粒酶B(GzmB)ELISA试剂盒 

试剂盒组成

实验步骤

1. 准备试剂盒：将试剂盒从冰箱中取出，室温放置30分钟以上，使试剂盒恢复至室温。

2. 加样：分别向各孔中加入标准品、待测样本和空白孔，每孔加入50μl。

3. 孵育：用封板胶纸封住反应孔，轻轻振荡混匀，37℃孵育1小时。

4. 洗涤：甩去孔内液体，用洗涤液充分洗涤4-5次，每次30秒。

5. 加酶标二抗：每孔加入50μl酶标二抗溶液，轻轻振荡混匀，37℃孵育30分钟。

6. 洗涤：甩去孔内液体，用洗涤液充分洗涤4-5次，每次30秒。

7. 加底物：每孔加入50μl底物溶液，轻轻振荡混匀，37℃孵育15-20分钟。

8. 终止反应：每孔加入50μl终止液，轻轻振荡混匀。

9. 读数：用酶标仪在450nm波长处读取各孔的光密度值。

结果判断

 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

注意事项

1. 试剂盒保存于2-8℃，切勿反复冻融或长时间保存于室温。

2. 实验前确保所有试剂均已恢复至室温。

3. 加样时注意避免产生气泡。

4. 洗涤时要保证充分洗涤，避免残留物影响实验结果。

5. 底物溶液应避光保存，避免长时间暴露于空气中。

6. 酶标仪应使用450nm波长进行读数，其他波长可能导致误差。

7. 本试剂盒仅用于科研实验和诊断参考，不适用于临床诊断和治疗。

公司简介

     上海笃玛生物科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。总部位于上海，并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“笃玛生物"良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨"的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及*的仓储和物流系统。“笃玛生物"已经得到全国科研工作者的认可。

      公司拥有一批专业的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买笃玛生物产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。

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