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简要描述:猴甲状腺原氨酸ELISA试剂盒质量稳定,准确性高。笃玛生物全程提供技术指导,确保您实验结果的准确性还提供免费代测服务。您只需提供代测样本,七个工作日内即可为您提供代测数据。欢迎前来咨询,订购。
猴甲状腺原氨酸ELISA试剂盒
实验原理
酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用的免疫学检测技术,其基本原理是利用抗原与抗体之间的特异性结合反应,通过酶促反应放大信号,检测微量的蛋白质、细胞因子等生物活性物质。ELISA实验中所需的试剂和耗材需满足一定的质量要求,以保证实验结果的准确性和可靠性。
产品包装:盒装
性状:瓶装液体
规格:96T/48T
保存条件:2-8℃
保存期限:6个月
运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
样本处理
在处理样本时,需要保证无菌操作,避免污染。同时,需要按照试剂盒说明书的要求,将样本进行适当的稀释和处理。如果样本中存在杂质或颗粒物,需要*行离心或过滤处理。
实验步骤
1. 抗原包被:将抗原溶液加入到酶标板孔中,包被抗原,使其在孔底形成一层薄膜。
2. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的抗原和其他杂质。
3. 阻断:加入阻断液,封闭酶标板孔中的非特异性结合位点,以减少非特异性结合。
4. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的阻断液和其他杂质。
5. 加样:加入待测样本,使其与抗原发生特异性结合。
6. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的样本和其他杂质。
7. 加酶标抗体:加入酶标记的抗体,使其与特异性结合的样本中的待测物质发生反应。
8. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的酶标抗体和其他杂质。
9. 显色反应:加入底物溶液,发生酶催化反应,产生有色产物。
10. 终止反应:加入终止液,停止酶催化反应。
11. 检测:用酶标仪测定各孔的光密度值,记录数据。
猴甲状腺原氨酸ELISA试剂盒
注意事项
在进行ELISA检测时,需要注意以下几点:
1. 保证试剂盒的质量:选择质量可靠、经过认证的试剂盒,避免使用过期或质量不稳定的试剂。
2. 标准化操作:按照试剂盒说明书进行标准化操作,避免操作过程中的人为误差。
3. 避免交叉污染:在实验过程中,要特别注意防止样品和试剂之间的交叉污染,以免影响检测结果的准确性。
4. 温度控制:ELISA检测需要在恒温条件下进行,因此要确保实验过程中温度的稳定和准确性。
5. 空白吸光度值:在实验过程中,要特别注意空白吸光度值的稳定性,避免其对检测结果的影响。
6. 实验数据的处理:对实验数据进行正确的处理和分析,包括对异常值的处理、数据转换等,以确保结果的准确性和可靠性。
7. 质量控制:在实验过程中,应进行必要的质量控制,如定期进行室内质控和室间质评等,以确保实验室检测结果的准确性。
结果判断
1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作图,如设置复孔,则应取其平均值计算。以标准品的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标,标准品的浓度为纵坐标,绘出标准曲线。
2. 推荐使用专业的曲线制作软件,如curve expert 1.3或1.4,在软件界面既可根据样品OD值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
3. 若样品OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。
涂层步骤的目的
在ELISA(酶联免疫吸附测定)实验中,涂层步骤是至关重要的,它是整个实验的基础。在这一步骤中,微孔板的每个孔都会被涂上捕获抗体或抗原,这些分子将固定在孔的表面并用于后续的特异性结合反应。以下是涂层步骤的作用和重要性:
1)提供固定化基础:涂层抗体或抗原在微孔板上形成一层稳定的、固定的基础,用于捕获样品中的目标分子(对应的抗原或抗体)。
2)确保特异性反应:选择特定的捕获抗体或抗原确保了ELISA的特异性。这意味着只有目标分子会特异性地结合到固定在孔上的分子,而非目标分子则不会。
3)增加灵敏度:通过在微孔板上固定足够的捕获分子,可以提高ELISA检测的灵敏度,允许检测到更低浓度的目标分子。
4)允许洗涤步骤:一旦目标分子被捕获分子固定,就可以进行多次洗涤以去除非特异性结合或未结合的成分,这有助于减少背景信号并提高结果的精确度。
5)适用于多种样品类型:涂层抗体或抗原可以与来自不同样品类型(如血清、血浆、细胞培养上清液等)的目标分子结合,使ELISA成为一种多功能的检测方法。
6)优化实验条件:通过优化涂层抗体或抗原的浓度和孵育条件,可以进一步提高实验的性能。
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