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购买抗体时关于特异性的挑选

更新时间:2024-04-28      浏览次数:72

购买抗体时关于特异性的挑选


特异性的挑选首要需求考虑四个方面:蛋白特异性、种属特异性、试验方法特异性、符号物的特异性。


1、蛋白特异性:


针对需求检测的蛋白查找抗体,几个细节要区分,重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测,对抗体的要求是不一样的,注意检查抗体说明书的检测说明。假如重组蛋白不是全长表达,则需求注意抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。


内源性蛋白能清楚其剪切与润饰的方式,特殊表型的蛋白需求进行序列比对,并结合抗体免疫原序列,检查穿插反应的状况。磷酸化蛋白检测需求确认具体位点,不同位点的磷酸化意味着或许有不同的机制存在,不宜混为一谈。


2、种属特异性:


同种蛋白不同物种,有着或大或小的差异。目前大部分商品化抗体都是以人源蛋白序列为模板重组蛋白或规划多肽抗原的,根据蛋白的同源性状况与其他种属发生穿插反应。需求参照说明书注明的可反应种属信息。


一些稀有种属很难找到抗体,可以经过蛋白的序列比对,挑选同源序列免疫的抗体,不过一般这种状况生产商不会受理其关于质量的申述,假如可以申请到免费的抗体样品,则利于抗体挑选。。

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3、符号物的特异性


一般基于试验操作的试验方法不会运用带有符号的一抗,比方WB、IHC等,都是经过二抗类的试剂符号达到成果出现的意图。可是基于仪器剖析的一些试验,或许就会运用到直接符号的一抗,比方流式试验。那么需求了解到自己将要运用的仪器能检测到的荧光规模,针对不通的参数要求挑选对应的符号物。在免疫荧光双标试验中,需求选配不同的荧光符号物。


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