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如果不按说明书操作可能会出现的不满意结果。
A. 先说最严重的操作错误,看错或压根不看试剂盒配套说明书,不按操作步骤加样。比如把竞争法的试剂盒当作双抗体夹心法来做,导致的结果就是整板显示很强的蓝色,无任何梯度。
B. 混用别的试剂盒里的试剂。不同厂家或者相同厂家的不同试剂盒,所含的试剂成分很可能是不一样的,混用导致的结果是,浪费珍贵的样本,样品的回收率达不到预期值,如果混用不同试剂盒的酶复合物,会导致显色过弱或过强,因为每种试剂盒所用酶复合物效价可能不一样。
C. 不看文献或者不做预实验。比如某个试剂盒按照其灵敏度范围和文献报道推算样本应该1:10稀释,结果稀释成1:1000,导致的结果是显色过弱,结果不可用。
D. 不校准移液器及培养箱的温度湿度。导致工作试剂浓度不准确,孵育温度不合适,实验带来误差。
E. 洗涤不充分,每孔洗液加样过少,或者残留。导致的结果是显色过快,同时背景较高。
F. 手洗板时所用枪头没有悬空加入洗液,导致洗液污染,整个实验失败。
G. 剩余酶标板条未及时放入干燥袋,导致酶标板受潮,下一次再做时,显色过弱或污染,CV值过高。
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