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简要描述:豚鼠磷脂酶A1(PLA1) ELISA 试剂盒:质量稳定,准确性高。笃玛生物全程提供技术指导,确保您实验结果的准确性还提供免费代测服务。您只需提供代测样本,七个工作日内即可为您提供代测数据。欢迎前来咨询,订购。
豚鼠磷脂酶A1(PLA1) ELISA 试剂盒
实验原理
试剂盒内容物包括:
Vial 1:含有钙,镁,碳酸氢盐和酚红的EBSS溶液,此试剂的等分液用于重溶其他小瓶和制备稀释的抑制剂溶液。
Vial 2:含有L-cysteine和EDTA的木瓜蛋白酶,每盒里包含5 × 100 unit可供一次性使用的小瓶。该试剂是0.22μm的膜过滤并在高压灭菌瓶中冻干。用5ml EBSS溶液重溶(Vial 1)可得到每毫升 1mM的 L-cysteine和0.5mM EDTA中20units的木瓜蛋白酶溶液。
Vial 3:脱氧核糖核酸酶I (DNase I),5×2000单位,每盒里包含5 × 100 unit可供一次性使用的小瓶。该试剂是0.22μm的膜过滤并在高压灭菌瓶中冻干。用0.5ml EBSS溶液重溶(Vial 1)可得到每毫升产生2000units的DNase I溶液。
Vial 4:类卵母细胞蛋白酶抑制剂Ovomucoid protease inhibitor,每包1瓶,重溶后体积为32ml。
该试剂是0.22μm的膜过滤并在高压灭菌瓶中冻干。用32ml的 EBSS溶液重溶(Vial 1)生成的溶液的有效浓度为每毫升10mg类卵母细胞抑制剂和10mg白蛋白。
神经组织分离试剂盒(Papain Dissociation System)
Papain Dissociation System是基于美国科学家Huettner和Baughman对神经细胞分离方法而研发出来的一套试剂(J. Neurosci., 6, 3044, 1986)。每个批次都在大鼠脊髓神经细胞分离中进行过性能测试,该试剂盒为每个实验提供新鲜制备的酶溶液。
该包装包含足够的材料分离5个独立的组织等分体,每个高达0.3-0.4立方厘米。对于较大的组织样本,在每个步骤中按比例准备较大体积的试剂,并按协议中所述的相同比例将其组合。
试剂盒组成
豚鼠磷脂酶A1(PLA1) ELISA 试剂盒
操作步骤
DNaseI通常有以下几个用途:
1. 去除细胞培养过程中DNA的含量,可以降低黏度,因此获得更多的细胞;
2. 用于生物过程中的DNA移除;
3. 在进行RT-PCR前,除去RNA制剂中的基因组DNA;
4. 体外转录
5. Nick翻译
6. DNase I足迹分析
7. 肌动蛋白结合
8. 蛋白质与核算的UV交联
9. 放射性标记
结果分析
1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作图,如设置复孔,则应取其平均值计算。以标准品的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标,标准品的浓度为纵坐标,绘出标准曲线。
2. 推荐使用专业的曲线制作软件,如curve expert 1.3或1.4,在软件界面既可根据样品OD值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
3. 若样品OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。
注意事项
1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为 0 的标准品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,终结果乘以5才是样本终浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。
7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。
8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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