CK(CK)测试盒  提供技术指导
用于体外定量测定人血清或血浆中CK含量的试剂盒，它是采用分光光度法原理，利用全自动、或分光光度计，在医学实验室进行CK定量检验所使用的临床化学体外诊断试剂。

分类
按检测原理分为以下两类
1. CK（酶偶联法）。包括连续监测法、IFCC推荐法、速率法、N-乙酰半法、磷酸肌酸底物法。
2. VK（比色法）

原理
CK（CreatineKinase,CK）通常存在于动物的心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体中，是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶，它可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应。CK测定的方法主要有肌酸显色法、酶偶联法，还有荧光法和生物发光法。CK检测试剂盒常用的方法是肌酸显色法和酶偶联法。

反应原理
（1）肌酸显色法（比色法）
磷酸肌酸+ADP 

 肌酸　+　ATP
肌酸++α-萘酚 

 红色化合物(λ=540nm)
在一定范围内，红色深浅与肌酸量成正比，从而可求得血清中CK活性。在反应体系中加入Mg作激活剂；半供给巯基，保持CK活性中心必需基团不被氧化；和硫酸锌沉淀蛋白并中止反应。
（2）酶偶联法
磷酸肌酸+ADP 

 肌酸+ATP
ATP+葡萄糖 

 ADP+6-磷酸葡萄糖
6-磷酸葡萄糖+NADP 

 6-磷酸葡萄糖+NADPH
利用酶偶联反应原理连续监测NADP还原生成NADPH，后者引起340nm吸光度的增高。在340nm监测单位时间内NADPH的生成量(ΔA/min)，可计算出CK的活性浓度。 

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2. 计算方法

（1）酶偶联法

式中6220为NADPH在340nm的摩尔吸光度，2.30为反应液的总体积(ml)，0.10为血清用量(ml)。ΔA/min为平均每分钟的吸光度变化值。
（2）肌酸显色法（比色法）

样本要去
1. 空腹采血，采血前不宜做剧烈运动。
2. 可用干燥管、肝素抗凝管采血加塞送检。
3. 避免采用溶血、乳穈状样品。血液分离血清后2～8℃可稳定一周。
检测意义

1．正常参考值

(1) 肌酸显色法：8～60U/L(0.5～3.6U)。
(2) 酶偶联法：男24～195U/L，女24～170U/L。

2.CK酶临床意义

增高：
(1) 主要用心肌梗死诊断，CK升高幅度较AST和LDH都大，且出现早，2-4小时开始升高，12-48小时达到高峰，2-4天恢复到正常。尤其对心肌缺血和心内膜下心肌梗死的诊断比其他酶灵敏度高。故动态检测CK变化有助于观察病情和预后估计。
(2) 还见于进行性肌营养不良发作期、病毒性心肌炎、多发性心肌炎、肌肉损伤或手术后、脑血管疾病、酒精中毒、甲状腺功能减退、肺梗塞等。
减低：见于甲状腺功能亢进症

注意事项

1. 肌酸显色法

(1) 肌酐、胍乙酸等也可与α-萘酚及产生颜色反应。故肾功能衰竭患者应用自身血清做空白对照，以消除肌酐的影响。
(2) α-萘酚为白色或略带黄色之结晶，颜色过深，应在乙醇中重结晶后再用。
(3) Mg为激活剂，半提供巯基，和硫酸锌沉淀蛋白并中和反应。
(4) 血清CK活性>200U/L时，应用已知CK活性正常的血清稀释后重测，其结果乘以稀释倍数。

2. 酶偶联法

(1) 最好使用血清作标本，也可用肝素抗凝血浆，因CK活性不稳定，室温仅能稳定4h，4℃仅稳定8～12h，故标本采集后应尽快分离血清，及时测定。不能及时测定，应避光、低温保存。温度升高引起的酶失活为不可逆的。
(2) 红细胞内不含CK，轻度溶血无影响，但中、重度溶血可因红细胞内释放出的AK、ATP及G6P，使CK值假性升高。
(3) Mg、Ca、Mn对该酶有激活作用，Cl、So、Po、枸橼酸、氟化物可抑制其活性。