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简要描述:人组织因子(TF)酶联免疫试剂盒:质量稳定,准确性高。笃玛生物全程提供技术指导,确保您实验结果的准确性还提供免费代测服务。您只需提供代测样本,七个工作日内即可为您提供代测数据。欢迎前来咨询,订购。
人组织因子(TF)酶联免疫试剂盒
试验原理
酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人组织因子(TF)酶联免疫试剂盒
人组织因子(TF)酶联免疫试剂盒操作步骤
1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9)在450nm波长处测定各孔的OD值。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4,请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本O D值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定计算时请最后乘以总稀释倍数(xn)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7,严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
酶联免疫吸附法的作用
酶联免疫吸附法(ELISA)是一种灵敏、特异的免疫学技术,常用于医学、生物领域中的抗原或抗体检测。其作用包括:
1.疾病诊断:ELISA可以用于检测体液或组织样本中的特定分子,如病毒抗原、细菌抗原、肿瘤标志物等,协助医生进行疾病诊断。
2.病毒抗体检测:ELISA可以用于检测血液中的病毒抗体,如乙型肝炎表面抗体、人类免疫缺陷病毒抗体等,用于流行病学调查和临床诊断。
3.药物疗效评估:ELISA可以用于检测用药后的药物疗效以及用药剂量对身体的化学反应等,帮助医生对患者进行个性化治疗。
4.生物分子检测:ELISA可以用于检测生物分子,如蛋白质、多肽、激素等,在生物医学研究领域得到广泛应用。
总之,酶联免疫吸附法在医学、生物领域中具有广泛的应用价值,是临床诊断和治疗中重要的辅助手段。
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