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人分泌因子(RANTES)酶联免疫试剂盒

  • 产品型号:96T/48T
  • 更新时间:2024-02-21

简要描述:人分泌因子(RANTES)酶联免疫试剂盒 :质量稳定,准确性高。笃玛生物全程提供技术指导,确保您实验结果的准确性还提供免费代测服务。您只需提供代测样本,七个工作日内即可为您提供代测数据。欢迎前来咨询,订购。

产品详情

人分泌因子(RANTES)酶联免疫试剂盒

 

试剂盒性能:

 

 检测范围:5 pg/mL – 160 pg/mL

 

 灵敏度:检测浓度小于1.0 pg/mL

 

 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

 

 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 

 

 

试剂盒组成:

 

1. 酶标板:用于包被抗原和加入酶标抗体;

 

2. 酶标抗体:与待测血清中的样本结合;

 

3. 抗原:用于包被酶标板,与待测血清中的样本结合;

 

4. 阴性对照血清:用于设置阴性和阳性对照;

 

5. 阳性对照血清:用于设置阴性和阳性对照;

 

6. 洗涤液:用于清洗酶标板;

 

7. 底物:用于显色反应;

 

8. 终止液:用于终止显色反应。

                                    

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人分泌因子(RANTES)酶联免疫试剂盒

 

 

ELISA的样本实验准备

    在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的可在-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。

液体类标本:  包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

 

1. 血清:

室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

 

2. 血浆:

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

 

3. 尿液:

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

 

4. 细胞培养上清:

检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。

 

5. 培养细胞

    检测细胞内的成份时,用PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

 

6. 组织标本

    切割标本后,称取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBSPH7.4),或组织蛋白萃取试剂用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。  

 

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人分泌因子(RANTES)酶联免疫试剂盒

 

操作步骤

  实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

 

1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。

为确认实验结果准确性,每次实验请使用新的标准品溶液。

 

2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加标记抗体工作液 100μl(取1μl标记抗体加99μl标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37,60分钟。

 

3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

 

4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同标记抗体工作液) 100μl37℃,60分钟。

 

5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

 

6.依序每孔加底物溶液90μl37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

 

7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了确认实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

 

8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

                                     

      

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人分泌因子(RANTES)酶联免疫试剂盒

 

 

笃玛代测服务:

技术服务内容: 1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。

寄标本时需注明以下情况:1、标本编号;2、所测项目;3、是否做复孔;4、实验后标本是否寄回。

                                                                        

问:代测,有什么具体要求?

样本要处理过的,寄来的样本附检验要求  (一定要附检验要求 )

样本寄来要记得保存好,一定要放置冷冻冰袋

 

:什么样的检验要求?要出示什么吗?

怎样算是处理过?还是就只是离心保存?

答:离心保存,检验要求,就是标本标号,和特殊要求

 

问:测好多指标 血清不分开可以么?

答:要分开,分好后,分别标上序列号,便于实验好区分。

 

 

 

 


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