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人半胱天冬酶3(CASP3)酶联免疫试剂盒

  • 产品型号:96T/48T
  • 更新时间:2024-02-21

简要描述:人半胱天冬酶3(CASP3)酶联免疫试剂盒:质量稳定,准确性高。笃玛生物全程提供技术指导,确保您实验结果的准确性还提供免费代测服务。您只需提供代测样本,七个工作日内即可为您提供代测数据。欢迎前来咨询,订购。

产品详情

半胱天冬酶3(CASP3)酶联免疫试剂盒


ELISA90分钟一步法的优点

ELISA90分钟一步法的优点主要包括:

1.操作简单:该方法只需要一步操作即可完成,操作过程简单明了,易于掌握。

2.快速:ELISA90分钟一步法可以在短时间内完成,适合于大批量样品的快速检测。

3.特异性高:该方法采用特定的抗体或抗原进行固定和检测,因此具有较高的特异性。

4.灵敏度高:ELISA90分钟一步法具有较高的灵敏度,可以检测出较低浓度的抗原或抗体。

5.重复性好:该方法的重复性较好,结果较为稳定。

6.安全性高:ELISA90分钟一步法不使用放射性同位素等有害物质,因此具有较高的安全性。

需要注意的是,ELISA90分钟一步法也存在一些缺点,例如可能会受到非特异性干扰因素的影响,导致结果不准确。此外,该方法的试剂成本较高,不适合于小规模样品的检测。

 

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人E-Cad抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人E-Cad与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入E-Cad抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人E-Cad抗体与结合在包被抗体上的人E-Cad结合、亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人E-Cad浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人E-Cad的浓度。

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半胱天冬酶3(CASP3)酶联免疫试剂盒


样品收集:
1. 血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2. 血浆:抗凝剂推荐使用EDTA-Na2,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mLPBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
5. 其它生物样品:1000×g离心20分钟,取上清即可检测
6. 样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。
7. 样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃6个月内检测),避免反复冻融。
8. 如果您的样品中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。

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半胱天冬酶3(CASP3)酶联免疫试剂盒

 

试验所需器材:
1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
4. 吸水纸



结果判断:
1
.以标准品的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标,标准品的浓度为纵坐标,绘出标准曲线。
2
. 推荐使用专业的曲线制作软件,如curve expert 1.31.4,在软件界面既可根据样品OD值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
3
. 若样品OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。

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