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猴间隙连接蛋白31(CX31)酶联免疫试剂盒

  • 产品型号:
  • 更新时间:2024-01-30

简要描述:猴间隙连接蛋白31(CX31)酶联免疫试剂盒
质量稳定,准确性高。笃玛生物全程提供技术指导,确保您实验结果的准确性还提供免费代测服务。您只需提供代测样本,七个工作日内即可为您提供代测数据。欢迎前来咨询,订购。

产品详情

猴间隙连接蛋白31(CX31)酶联免疫试剂盒 



本试剂盒基于检测样本的特异性抗体包被酶标板,加入待测样本,样本与包被在酶标板上的特异性抗体结合,形成免疫复合物。清洗后加入酶标二抗,与免疫复合物结合,形成完整的三明治复合物。再加入底物溶液,底物在酶的作用下变色,颜色的深浅与样本的浓度呈正相关。最后加入终止液,使反应停止,在450nm波长下测量各孔的光密度值(OD值),通过标准曲线计算样本的浓度。


猴间隙连接蛋白31(CX31)酶联免疫试剂盒 

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实验步骤

1. 准备试剂盒:将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟以上,使试剂盒恢复至室温。

2. 加样:分别向各孔中加入标准品、待测样本和空白孔,每孔加入50μl。

3. 孵育:用封板胶纸封住反应孔,轻轻振荡混匀,37℃孵育1小时。

4. 洗涤:甩去孔内液体,用洗涤液充分洗涤4-5次,每次30秒。

5. 加酶标二抗:每孔加入50μl酶标二抗溶液,轻轻振荡混匀,37℃孵育30分钟。

6. 洗涤:甩去孔内液体,用洗涤液充分洗涤4-5次,每次30秒。

7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,轻轻振荡混匀,37℃孵育15-20分钟。

8. 终止反应:每孔加入50μl终止液,轻轻振荡混匀。

9. 读数:用酶标仪在450nm波长处读取各孔的光密度值。


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检测前准备工作:

1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。

2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶溶解后再配制洗涤液(加热温度不要超过50℃,使用时洗涤液应为室温)。当日使用。

3. 标准品: 于10000×g离心1分钟,加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中,旋紧管盖,静置10分钟,上下颠倒数次,待其充分溶解后,用移液器将其轻轻混匀(浓度为8000pg/mL)。然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接在反应孔中进行倍比稀释)。建议配制成以下浓度:按照稀释方法图例 标准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中,混匀即可,其余浓度依此类推。

4. 生物su化抗体工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以生物su化抗体稀释液稀释浓缩生物su化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。

5. 酶结合物工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。

当日使用。


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注意事项

在进行ELISA检测时,需要注意以下几点:

1. 保证试剂盒的质量:选择质量可靠、经过认证的试剂盒,避免使用过期或质量不稳定的试剂。

2. 标准化操作:按照试剂盒说明书进行标准化操作,避免操作过程中的人为误差。

3. 避免交叉污染:在实验过程中,要特别注意防止样品和试剂之间的交叉污染,以免影响检测结果的准确性。

4. 温度控制:ELISA检测需要在恒温条件下进行,因此要确保实验过程中温度的稳定和准确性。

5. 空白吸光度值:在实验过程中,要特别注意空白吸光度值的稳定性,避免其对检测结果的影响。

6. 实验数据的处理:对实验数据进行正确的处理和分析,包括对异常值的处理、数据转换等,以确保结果的准确性和可靠性。

7. 质量控制:在实验过程中,应进行必要的质量控制,如定期进行室内质控和室间质评等,以确保实验室检测结果的准确性。



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样品收集、处理及保存方法

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。

3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。


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结果判断:

1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作图,如设置复孔,则应取其平均值计算。以标准品的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标,标准品的浓度为纵坐标,绘出标准曲线。

2. 推荐使用专业的曲线制作软件,如curve expert 1.3或1.4,在软件界面既可根据样品OD值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

3. 若样品OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。



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ELISA试剂盒适用行业

ELISA试剂盒广泛应用于生命科学研究、临床医学和工业等领域。

1.在生命科学研究领域,ELISA试剂盒可以用于检测细胞因子、激素、酶、抗体等分子的含量和活性,用于生理学、免疫学、分子生物学等研究领域。

2.在临床医学诊断中,ELISA试剂盒可以用于检测血清中的肿瘤标志物、病毒抗体、心肌酶等指标,用于临床诊断及疾病监测。

3.在食品安全检测中,ELISA试剂盒可以用于检测食品中的抗生素残留、农药残留等有害物质,用于食品质量检测和安全评估。

4.在环境监测中,ELISA试剂盒可以用于检测环境中的化学物质、微生物等污染物,用于环境监测和污染治理。

5.在动物疾病防控中,ELISA试剂盒可以用于检测动物血清中的病毒抗体、细菌抗原等指标,用于动物疫病防控和兽药残留检测。

总之,ELISA试剂盒在许多行业中都有广泛的应用。


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