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猴转录激活因子-1(ATF-1)酶联免疫试剂盒

  • 产品型号:
  • 更新时间:2024-01-29

简要描述:猴转录激活因子-1(ATF-1)酶联免疫试剂盒
质量稳定,准确性高。笃玛生物全程提供技术指导,确保您实验结果的准确性还提供免费代测服务。您只需提供代测样本,七个工作日内即可为您提供代测数据。欢迎前来咨询,订购。

产品详情


猴转录激活因子-1(ATF-1)酶联免疫试剂盒 


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实验原理


酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用的免疫学检测技术,其基本原理是利用抗原与抗体之间的特异性结合反应,通过酶促反应放大信号,检测微量的蛋白质、细胞因子等生物活性物质。ELISA实验中所需的试剂和耗材需满足一定的质量要求,以保证实验结果的准确性和可靠性。


猴转录激活因子-1(ATF-1)酶联免疫试剂盒 

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标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N"倍,标本的浓度应再乘以“N"。 

标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 

生物su标记抗体的稀释原则临用前以生物su标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物su标记抗体加990μl生物su标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 

辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 


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操作步骤


1. 包被:将抗原溶液加入聚苯乙烯酶标板孔中,包被抗原,37℃孵育1小时。

2. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的抗原和其他杂质。

3. 阻断:加入阻断液,37℃孵育30分钟,以封闭酶标板上的非特异性结合位点。

4. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的阻断液和其他杂质。

5. 加样:加入标准品和待测样本,37℃孵育1小时。

6. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的蛋白质。

7. 加酶标抗体:加入酶标记的抗体,37℃孵育1小时。

8. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的酶标抗体。

9. 显色:加入TMB底物溶液,37℃孵育15-30分钟。

10. 终止反应:加入终止液,停止显色反应。

11. 检测:在450nm波长下读取吸光度值(OD值)。


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注意事项


1. 试剂盒保存于2-8℃,切勿反复冻融或长时间保存于室温。

2. 实验前确保所有试剂均已恢复至室温。

3. 加样时注意避免产生气泡。

4. 洗涤时要保证充分洗涤,避免残留物影响实验结果。

5. 底物溶液应避光保存,避免长时间暴露于空气中。

6. 酶标仪应使用450nm波长进行读数,其他波长可能导致误差。

7. 本试剂盒仅用于科研实验和诊断参考,不适用于临床诊断和治疗。


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样本处理


在处理样本时,需要保证无菌操作,避免污染。同时,需要按照试剂盒说明书的要求,将样本进行适当的稀释和处理。如果样本中存在杂质或颗粒物,需要*行离心或过滤处理。


洗板方法


1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5次。

2.自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。


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结果判断

 

绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。


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ELISA试剂盒适用行业


ELISA试剂盒广泛应用于生命科学研究、临床医学和工业等领域。

1.在生命科学研究领域,ELISA试剂盒可以用于检测细胞因子、激素、酶、抗体等分子的含量和活性,用于生理学、免疫学、分子生物学等研究领域。

2.在临床医学诊断中,ELISA试剂盒可以用于检测血清中的肿瘤标志物、病毒抗体、心肌酶等指标,用于临床诊断及疾病监测。

3.在食品安全检测中,ELISA试剂盒可以用于检测食品中的抗生素残留、农药残留等有害物质,用于食品质量检测和安全评估。

4.在环境监测中,ELISA试剂盒可以用于检测环境中的化学物质、微生物等污染物,用于环境监测和污染治理。

5.在动物疾病防控中,ELISA试剂盒可以用于检测动物血清中的病毒抗体、细菌抗原等指标,用于动物疫病防控和兽药残留检测。

总之,ELISA试剂盒在许多行业中都有广泛的应用。


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