相关文章ARTICLES

致力于成为更好的解决方案供应商!

产品中心/ PRODUCTS

我的位置:首页  >  产品中心  >  ELISA试剂盒  >  猴子ELISA试剂盒  >  猴CD163分子(CD163)酶联免疫试剂盒

猴CD163分子(CD163)酶联免疫试剂盒

  • 产品型号:
  • 更新时间:2024-01-26

简要描述:猴CD163分子(CD163)酶联免疫试剂盒
上海笃玛生物科技有限公司长期为高校及医院等研究机构提供各类品质过硬,价格实惠,售后完善的生化试剂,公司拥有完善的库存及供应体系以及高效稳定的利纯化技术,保证产品均能现货供应和产品质量的稳定性,相关活动信息可联系客服。

产品详情

猴CD163分子(CD163)酶联免疫试剂盒



试剂盒性能:


1. 检测范围:1.95 nmol/L –100 nmol/L。

2. 灵敏度:检测浓度小于0.78 nmol/L。

3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。


638415139066495862542.jpg


实验原理


酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用的免疫学检测技术,其基本原理是利用抗原与抗体之间的特异性结合反应,通过酶促反应放大信号,检测微量的蛋白质、细胞因子等生物活性物质。ELISA实验中所需的试剂和耗材需满足一定的质量要求,以确保实验结果的准确性和可靠性。


638392711715653592859.jpg


标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N"倍,标本的浓度应再乘以“N"。 

   标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 

   生物su标记抗体的稀释原则:临用前以生物su标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物su标记抗体加990μl生物su标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 

   辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 


猴CD163分子(CD163)酶联免疫试剂盒

638415123898798900897.jpg


什么时候进行ELISA测试时需要准备一系列稀释样本?


1)未知样本浓度:当你不知道样本中抗原或抗体的浓度时,准备一系列稀释样

可以帮助确保至少有一些稀释度落在ELISA的线性检测范围内。

2)避免信号饱和:对于浓度较高的样本,稀释可以防止信号饱和,即吸光度值超

出光度计的最大读数,从而确保结果的线性和准确性。

3)减少高剂量挂钩效应:在某些情况下,过高的抗原浓度会导致检测抗体无法形

成“夹心"结构,反而降低了检测信号,这称为“挂钩效应"。稀释样本可以避免这一

现象。

4)优化检测条件:为了找到最佳的检测条件和稀释度,初步实验通常会涵盖广泛

的稀释范围,以便后续实验可以直接使用最佳稀释度。

5)建立标准曲线:对于定量ELISA,需要使用一系列已知浓度的标准品来建立标准

曲线,未知样本的结果将与此曲线比较以确定其浓度。

6)控制非特异性结合:稀释样本可以减少非特异性结合,这种结合可能在高浓度

样本中更为常见。

7)实验重复性和可比性:为了确保实验的重复性和可比性,对于不同时间点或不

同实验条件下的样本,通常需要准备相同的稀释系列。

8)特殊样本类型处理:某些样本类型(如血清、血浆或含有抑制剂的样本)可能

需要稀释以减少背景干扰或抑制剂的影响。


638393545327550764200.jpg


操作步骤:


1. 加样:设置空白孔、标准孔和待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl。注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。每次实验都应制作标准曲线。如果样品浓度过高,可以用样品稀释液进行稀释,使样品符合试剂盒的检测范围。

2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物su标记抗体工作液 100μl(取1μl生物su标记抗体加99μl生物su标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

3. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物su标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

4. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

5. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了确保实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

6. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后15分钟以内进行检测。


638393545140054276271.jpg


结果分析


根据试剂盒提供的标准品浓度及对应的OD值,利用标准品绘制的标准曲线,计算待测样品的浓度。一般采用拟合曲线法或直线回归法进行数据处理,通过计算得到待测样品的浓度。


638393686568754481804.png


试剂盒会出现的问题及解决办法:


1. 加入反应终止液后,没有吸光值或吸光值偏低。

a.原因:未加入酶标记物。

解决办法:请按照操作步骤进行。

b.原因:试剂盒内容物未能充分回。

解决办法:确定试剂盒内容物回温后再进行操作。

c.原因:室温太低。

解决办法:若室温太低(<19℃),请于操作步骤4,适当延长温育时间。

d.原因:未使用试剂盒的清洗液清洗。

解决办法: 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。

e.原因:试剂盒已过有效期限。

解决办法:请更换成仍在有效期限内的试剂盒。

2. 标准曲线线性不佳,或是平行性不好。

a.原因:温育位置避光不好或受到气流干扰。

解决办法: 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。

b.原因:操作时间拖太久。

解决办法:请在方法熟练后再进行操作。

c.原因:微孔间相互污染。

解决办法: 加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。

d.原因:标准品或酶标记物所加入的量不一致。

解决办法:请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合性。

e.原因:添加样品或试剂的操作方法不正确。

解决办法:加样品或试剂时,吸头请勿接触微孔。

f.原因:洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。

解决办法:请随时监控洗板机洗板过程,洗完后立即进行下一步骤。

638392793230911870957.png


3. 吸光值均偏高(或线性不够陡)。

a.原因:室温太高(>25℃)。

解决办法: 若无法降低室内温度,请适当缩短步骤4的温育时间。

b.原因:底物溶液受到污染。

解决办法: 若发现底物溶液已呈现淡蓝色,请不要再使用。

c.原因:反应时间超过太久。

解决办法:请控制反应时间。

d.原因:酶标记物污染了盒内其它试剂。

解决办法:使用过的吸头应立即丢弃,可避免试剂间相互污染,凡是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清洗干净。(先以漂白水浸泡,再以清水冲洗干净,可确保无残留)

4. 阴性标准品的吸光值低于阳性标准品的吸光值。

a.原因:微孔中的试剂未能充分混合。

解决办法: 试剂加完后,需轻敲盘四周使其充分混合均匀。

b.原因:洗板过程发生问题(同2-f.)。

解决办法:请参考2-f.

c.原因:添加样品或酶标记物的量不一致。

解决办法: 请参考2-d.



相关产品


DM-M57298猴抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)酶联免疫试剂盒  Monkey AGA (Anti-Gliadin Antibody) ELISA Kit
DM-M57299猴胰岛素样生长因子2(IGF-2)酶联免疫试剂盒 Monkey IGF-2 (Insulin Like Growth Factor 2) ELISA Kit 
DM-M57300猴信号传导转录激活因子6B(STAT56B)酶联免疫试剂盒Monkey STAT6B (Signal Transducer and Activator of Transcription 6B) ELISA Kit 
DM-M57301猴补体成分4a(C4a)酶联免疫试剂盒Monkey C4a (Complement Component 4a) ELISA Kit
DM-M57302猴肝配蛋白A3 (EFNA3)酶联免疫试剂盒Monkey EFNA3 (Ephrin A3) ELISA Kit 
DM-M57303猴N-乙酰α-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGLU)酶联免疫试剂盒Monkey NAGLU (N-Acetyl Alpha-D-Glucosaminidase) ELISA Kit 
DM-M57304猴斑型POZ蛋白(SPOP)酶联免疫试剂盒Monkey SPOP (Speckle Type POZ Protein) ELISA Kit 
DM-M57305猴基质金属蛋白酶12(MMP-12)酶联免疫试剂盒Monkey MMP-12 (Matrix Metalloproteinase 12) ELISA Kit
DM-M57306猴周期素依赖性激酶8(CDK8)酶联免疫试剂盒 Monkey CDK8 (Cyclin Dependent Kinase 8) ELISA Kit
DM-M57307猴肝配蛋白A5 (EFNA5)酶联免疫试剂盒Monkey EFNA5 (Ephrin A5) ELISA Kit 
DM-M57308猴骨骼肌快肌肌钙蛋白I(TNNI2)酶联免疫试剂盒Monkey TNNI2 (Troponin I Type 2, Fast Skeletal) ELISA Kit
DM-M57309猴胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)酶联免疫试剂盒Monkey TP (Thymidine Phosphorylase) ELISA Kit
DM-M57310猴结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒 Monkey CCA (Colon Cancer Antigen) ELISA Kit
DM-M57311猴核孔蛋白37kda(NUP37)酶联免疫试剂盒Monkey NUP37 (Nucleoporin 37kDa) ELISA Kit
DM-M57313猴蛋白激酶C(PKC)酶联免疫试剂盒Monkey PKC (Protein Kinase C) ELISA Kit
DM-M57314猴信号传导转录激活因子1(STAT1)酶联免疫试剂盒Monkey STAT1 (Signal Transducer and Activator of Transcription 1) ELISA Kit 
DM-M57315猴转录激活因子-3(ATF-3)酶联免疫试剂盒 Monkey ATF-3 (Activating Transcription Factor 3) ELISA Kit
DM-M57316猴β-促脂素(β-LPH)酶联免疫试剂盒 Monkey β-LPH (β-Lipotropic Hormone) ELISA Kit
DM-M57317猴糖原合成酶激酶3β(GSK3β)酶联免疫试剂盒 Monkey GSK3β (Glycogen Synthase Kinase 3 Beta) ELISA Kit
DM-M57318猴SPARC样蛋白1(SPARCL1)酶联免疫试剂盒Monkey SPARCL1 (SPARC Like Protein 1) ELISA Kit
DM-M57319猴VI型胶原(COL6)酶联免疫试剂盒 Monkey COL6 (Collagen Type VI) ELISA Kit
DM-M57320猴补体组分1Q受体1(C1qR1)酶联免疫试剂盒Monkey C1qR1 (Complement Component 1q Receptor) ELISA Kit 
DM-M57321猴肌联蛋白抗体(TTN)酶联免疫试剂盒 Monkey TTN (Titin) ELISA Kit
DM-M57322猴细胞色素P450家族成员1A2(CYP1A2)酶联免疫试剂盒 Monkey CYP1A2 (Cytochrome P450 1A2) ELISA Kit 


在线咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
版权所有©2024 上海笃玛生物科技有限公司 All Rights Reserved   备案号:沪ICP备15023134号-2   sitemap.xml
技术支持:化工仪器网   管理登陆

网站二维码

TEL:15214367449

扫码添加微信