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猴血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒

  • 产品型号:
  • 更新时间:2024-01-23

简要描述:猴血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒
高质量优化的笃玛生物ELISA试剂盒使您能够从容、可靠和一致地测量靶标特异性蛋白质。可提供多种 ELISA试剂盒规格,包括完整的、即用型试剂盒以及可DIY预优化试剂。ELISA试剂盒和抗体对可用于一系列不同的物种,包括人类、小鼠、大鼠、非人类灵长类、犬、猪、牛、马。

产品详情


猴血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒



本试剂盒基于检测样本的特异性抗体包被酶标板,加入待测样本,样本与包被在酶标板上的特异性抗体结合,形成免疫复合物。清洗后加入酶标二抗,与免疫复合物结合,形成完整的三明治复合物。再加入底物溶液,底物在酶的作用下变色,颜色的深浅与样本的浓度呈正相关。最后加入终止液,使反应停止,在450nm波长下测量各孔的光密度值(OD值),通过标准曲线计算样本的浓度。




检测前准备工作:


1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。

2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶溶解后再配制洗涤液(加热温度不要超过50℃,使用时洗涤液应为室温)。当日使用。

3. 标准品: 于10000×g离心1分钟,加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中,旋紧管盖,静置10分钟,上下颠倒数次,待其充分溶解后,用移液器将其轻轻混匀(浓度为8000pg/mL)。然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接在反应孔中进行倍比稀释)。建议配制成以下浓度:按照稀释方法图例 标准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中,混匀即可,其余浓度依此类推。 

4. 生物su化抗体工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以生物su化抗体稀释液稀释浓缩生物su化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。

5. 酶结合物工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。

当日使用。


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实验步骤

1. 样品收集与处理

(1)根据需要收集不同种类的样品,如血清、血浆、尿液等。

(2)对于血清和血浆样品,将采集的血液静置一段时间后,离心分离出血清或血浆。

(3)对于尿液样品,收集尿液后,可直接进行检测。

2. 样品稀释

根据试剂盒说明,对需要稀释的样品进行适当比例的稀释。

3. 加样

(1)按照试剂盒说明,分别将标准品、质控品和待测样品加入相应的孔中。

(2)每孔加入50μL,轻轻震荡混匀。

4. 封闭

根据试剂盒说明,加入适量的封闭液,覆盖板孔,并轻轻震荡混匀。封闭液一般为含有一定浓度的非特异性结合配体的溶液,可以降低非特异性结合的影响。

5. 洗涤

(1)将板孔洗涤液加入到每个孔中,轻轻震荡,然后倒掉洗涤液。重复洗涤3次,每次用洗涤液充分洗涤

(2)最后一次洗涤后,用纸巾轻轻吸干板孔表面的水分。

6. 酶标二抗加入及孵育

(1)根据试剂盒说明,将酶标二抗加入相应的孔中。

(2)孵育一定时间后,将板孔中的溶液倒掉。

7. 洗涤与显色

(1)重复步骤5的洗涤过程。

(2)加入显色剂,孵育一定时间后,将板孔中的溶液倒掉。

8. 终止反应与读数

(1)加入终止液,终止酶促反应。

(2)用酶标仪在450nm波长处读取各孔的光密度值(OD值)。


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结果判断

 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。


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操作注意事项

1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3. 浓度为 0 的标准品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,终结果乘以5才是样本终浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。

7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。


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猴血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒


免责声明

试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或生物体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担, 本公司概不负责。

严格按照说明书操作,不同批号不可交换使用,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。



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