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猴肾损伤分子1(KIM-1)酶联免疫试剂盒

  • 产品型号:
  • 更新时间:2024-01-23

简要描述:猴肾损伤分子1(KIM-1)酶联免疫试剂盒
高质量优化的笃玛生物ELISA试剂盒使您能够从容、可靠和一致地测量靶标特异性蛋白质。可提供多种 ELISA试剂盒规格,包括完整的、即用型试剂盒以及可DIY预优化试剂。ELISA试剂盒和抗体对可用于一系列不同的物种,包括人类、小鼠、大鼠、非人类灵长类、犬、猪、牛、马。

产品详情

猴肾损伤分子1(KIM-1)酶联免疫试剂盒  



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实验原理


酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用的免疫学检测技术,其基本原理是利用抗原与抗体之间的特异性结合反应,通过酶促反应放大信号,检测微量的蛋白质、细胞因子等生物活性物质。ELISA实验中所需的试剂和耗材需满足一定的质量要求,以保证实验结果的准确性和可靠性。


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操作步骤:


1. 加样:设置空白孔、标准孔和待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl。注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。每次实验都应制作标准曲线。如果样品浓度过高,可以用样品稀释液进行稀释,使样品符合试剂盒的检测范围。

2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物粟标记抗体工作液 100μl(取1μl生物su标记抗体加99μl生物su标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

3. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物su标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

4. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

5. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

6. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后15分钟以内进行检测。


猴肾损伤分子1(KIM-1)酶联免疫试剂盒 

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试剂盒组成


试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)


密封袋

1个

1个


酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

标准品:36U/L

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶标试剂

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

样品稀释液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)





准备工作


1.孔板室温平衡1小时

2.做好布板图谱

3.样本解冻

4.准备各型号的移液枪、枪头、量筒

5.准备双蒸水

6.根据样本量配好样本希释液

7.根据样本量及洗板次数配好洗液

8.若需要提前设置好振板器、洗板器

9.准备足够量的擦手纸

10.根据说明书提示,溶解标准品

11.配制不同浓度的标准品

12.配制质控品

13.根据预实验结果稀释样本

14.准备好封板膜


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保存条件及有效期


1.试剂盒保存:2-8℃。

2.有效期:6个月


洗板方法


1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5次。

2.自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。


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注意事项


在进行ELISA检测时,需要注意以下几点:

1. 保证试剂盒的质量:选择质量可靠、经过认证的试剂盒,避免使用过期或质量不稳定的试剂。

2. 标准化操作:按照试剂盒说明书进行标准化操作,避免操作过程中的人为误差。

3. 避免交叉污染:在实验过程中,要特别注意防止样品和试剂之间的交叉污染,以免影响检测结果的准确性。

4. 温度控制:ELISA检测需要在恒温条件下进行,因此要确保实验过程中温度的稳定和准确性。

5. 空白吸光度值:在实验过程中,要特别注意空白吸光度值的稳定性,避免其对检测结果的影响。

6. 实验数据的处理:对实验数据进行正确的处理和分析,包括对异常值的处理、数据转换等,以确保结果的准确性和可靠性。

7. 质量控制:在实验过程中,应进行必要的质量控制,如定期进行室内质控和室间质评等,以确保实验室检测结果的准确性。



结果分析


根据试剂盒提供的标准品浓度及对应的OD值,利用标准品绘制的标准曲线,计算待测样品的浓度。一般采用拟合曲线法或直线回归法进行数据处理,通过计算得到待测样品的浓度。




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