猴VI型胶原α1(COL6α1)酶联免疫试剂盒

猴VI型胶原α1(COL6α1)酶联免疫试剂盒 

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联吸附试验（ELISA）。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。

产品包装：盒装

性状：瓶装液体

规格：96T/48T

保存条件：2-8℃

保存期限：6个月

运输条件：2-8℃低温运输，用干冰或者生物冰袋低温运输。

猴VI型胶原α1(COL6α1)酶联免疫试剂盒 

实验步骤

1. 准备：准备好所有试剂、材料和器具。

2. 温育：将包被有特异性抗体的酶标板放入37℃温箱中温育30分钟。

3. 加样：分别向各孔中加入标准品、待测样本，轻轻混匀。

4. 温育：将酶标板放入37℃温箱中继续温育30分钟。

5. 洗涤：清洗酶标板，除去未结合的抗原抗体。

6. 加酶标二抗：向各孔中加入酶标二抗，轻轻混匀。

7. 温育：将酶标板放入37℃温箱中继续温育30分钟。

8. 洗涤：清洗酶标板，除去未结合的酶标二抗。

9. 加底物溶液：向各孔中加入底物溶液，轻轻混匀。

10. 显色：将酶标板放入37℃温箱中继续温育15分钟。

11. 终止：向各孔中加入终止液，混匀。

12. 测量：在450nm波长下测量各孔的光密度值（OD值）。

试剂盒组成

实验注意事项

1. 抗原和抗体的储存：应严格按照说明书要求存放抗原和抗体，避免反复冻融和长时间暴露在高温环境中。同时要保证试剂盒未过期，以获得可靠的实验结果。

2. 加样技术：加样时应保证加入的体积准确且不产生气泡，避免加在孔壁的边缘，以免影响与固相表面的接触。加样时应在每孔的旁边放置一个加样对照孔，以监测加样的准确性和重复性。

3. 温育：温育是ELISA实验中的重要步骤，温育时间和温度的控制对于抗原抗体反应的进行和结果的影响至关重要。必须严格按照说明书要求进行温育，并注意保持恒温状态。

4. 洗涤：洗涤是ELISA实验中的一步，它可以去除未结合的物质，提高检测的特异性和灵敏度。洗涤时应保证每次洗涤时间充足，并更换洗涤液以保证洗涤效果。同时要避免在洗涤过程中产生气泡，以免影响洗涤效果。

结果判断:

1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作图，如设置复孔，则应取其平均值计算。以标准品的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标，标准品的浓度为纵坐标，绘出标准曲线。

2. 推荐使用专业的曲线制作软件，如curve expert 1.3或1.4，在软件界面既可根据样品OD值，由标准曲线查出相应的浓度，乘以稀释倍数；亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

3. 若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。 

洗板方法

1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置 1min 后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板 5次。

2.自动洗板机：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。

公司简介

      上海笃玛生物科技有限公司是一家国内合资集科研和生产为一体的专业化生物公司。专业提供各类进口品牌，研发生产ELISA试剂盒、细胞株、抗体、耗材、培养基等产品，并提供实验外包，技术指导，操作指导，代做实验，代做课题等技术服务。公司拥有研发团队、研发平台及现代化的生产基地，生产各类科研用的产品。 我们由衷的感谢海内外科学家、感谢国内外广大科研工作者、学者予以我们鼎力的支持和理解，我们将在未来的工作中，百尺竿头，发挥优势，勇于开拓、自主创新、敢为人先、锲而不舍，在生命科学的道路上，不断进取，奋发努力，瞄准国际生命科学的前沿，不断创新研发新产品。为科研工作提供更好、更人性化的服务。

（Shanghai Duoma Biotechnology Co. , Ltd is a domestic joint venture integrating scientific research and production as one of the specialized biological companies. We specialize in providing various imported brands, R&D and production of ELISA kits, cell strains, antibodies, consumables, culture media and other products, as well as technical services such as experimental outsourcing, technical guidance, operation guidance, experimentation and research. The company has a world-class R&D team, leading technology, cutting-edge R&D platform and modern production base to produce various scientific research products. We are sincerely grateful to scientists at home and abroad, scientific researchers and scholars at home and abroad for their strong support and understanding. In the future work, we will give full play to our advantages, dare to pioneer, independently innovate, dare to be pioneering and persevere, keep forging ahead on the road of life science, strive hard, aim at the frontier of international life science, and continuously innovate and develop new products. Provide better and more humanized services for scientific research.）

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