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人激酶锚定蛋白12(AKAP12) ELISA 试剂盒
ELISA试剂盒的原理
ELISA是一种基于抗原-抗体反应的检测方法。在ELISA试剂盒中,已知的AKAP12抗体被固定在固相载体上,当加入待测样本后,样本中的AKAP12与固相抗体结合。然后加入酶标记的AKAP12抗体,与固相抗体上的AKAP12形成抗原-抗体复合物。最后加入底物显色,根据颜色的深浅,即可判断待测样本中AKAP12的浓度。
ELISA试剂盒的使用步骤
1. 准备样本:采集待测样本,根据试剂盒说明书的要求进行适当的处理。
2. 加样:将处理后的样本加入到ELISA板孔中,根据试剂盒说明书的要求控制加样量。
3. 孵育:将ELISA板放入37℃孵育一定时间,使AKAP12与抗体结合。
4. 洗涤:按照试剂盒说明书的要求,将未结合的物质洗涤掉。
5. 酶标抗体加入:按照试剂盒说明书的要求,加入酶标记的抗体。
6. 孵育:再次将ELISA板放入37℃孵育一定时间。
7. 洗涤:再次按照试剂盒说明书的要求,将未结合的物质洗涤掉。
8. 显色:加入底物显色。
9. 终止反应:加入终止液,停止显色反应。
10. 读数:用酶标仪在450nm波长处读取各孔的光密度值(OD值),根据OD值计算AKAP12的浓度。
人激酶锚定蛋白12(AKAP12) ELISA 试剂盒
注意事项
1. 使用前应仔细阅读说明书,确保了解所有操作步骤和注意事项。
2. 确保试剂盒在有效期内且未开封使用过。如发现试剂盒损坏或过期,应立即停止使用。
3. 操作过程中应保持清洁卫生,避免交叉污染。
4. 严格按照试剂盒说明书的要求进行加样和孵育等操作,确保实验结果的准确性。
5. 在显色反应期间,应避免光线直接照射到ELISA板,以免影响实验结果。
6. 在读数时,应选择合适的波长进行测量,确保实验结果的准确性。
7. 如发现实验结果异常或不符合预期,应重新进行实验或咨询专业人士的意见。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
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