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1、培育果蝇的器皿要严格消毒。培育瓶洗洁净后,自然凉干,再与棉塞一道进行高温枯燥灭菌(120℃,30min) 。
2、养分要全面。种类许多,本实验室用的是玉米培育基。
配方:
水750mL煮开,加琼脂6.2g,待琼脂溶解后加白糖62.5g,拌和溶解后加调成糊状的玉米糊,煮开2~3min,加酵母粉7g,加热1~2min,拌和均匀后,移去火源,加丙酸2mL。培育基稍稍冷却后,倒入已灭菌的瓶中,尽量不要粘在瓶壁上,塞好棉塞,放入仍有余热的枯燥箱中将瓶壁上的水蒸干。
3、接种时消好毒。在无菌室内接种,如没有无菌室,在接种前用75%酒精棉球擦双手一遍。接种后,放入适宜果蝇成长温度的培育箱中培育果蝇(温度20~25℃),一旦下一代成蝇孵出来后,这样就就不易长霉啦。
培育基的霉后处理办法
由于霉菌孢子漂浮于培育瓶的整个空间,包括果蝇身上,如将此果蝇接种到新的里边,大约经过4 ~5d,培育基将会重新长出霉菌来。遇到该问题,解决的办法只要两种:① 不再接种这种长霉菌果蝇,重新接种未长霉的果蝇;② 采取办法杀死果蝇身上的霉菌孢子。
杀霉菌办法:
将带有霉菌孢子的成蝇倒入空培育瓶中,棉塞上倒适量的75%酒精,再将瓶口塞紧,使用酒精具有蒸发性,蒸发后的酒精充满整个瓶内,从而将果蝇身上的霉孢子杀死。
上海酶联生物提醒注意:
1、倒在棉塞上的酒精量要适宜,过多果蝇易醉昏,过少杀死不了霉菌孢子;
2、果蝇呆在空瓶内的时间要恰当,以2d为好。
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