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血清质量鉴定与防挥发的方法

更新时间:2024-03-20      浏览次数:203

血清质量鉴定与防挥发的方法

一 、鉴定的方法

1、理化性质:蛋白含量包括血清总蛋白含量、球蛋白含量、血红蛋白含量等。其中球蛋白含量是一项非常重要的指标,血清中球蛋白主要是抗体,球蛋白含量越低血清质量越高。血红蛋白也是越低越好。

2、微生物检测:对支原体、病毒的检测,支原体是一种很小的微生物,可通过孔径22u的滤膜。支原体、病毒污染在光学显微镜下难于察觉,细胞也能生长繁殖,但会影响实验结果。

3、促生长效果:这是血清重要的特性,应当以培养的细胞来检测。

4、对于使用者:判断血清质量先从外观入手。好的血清应该是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊、不透明、含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若血清呈棕红色,说明血清中的血红蛋白含量太高,取材时有溶血现象。


二、防发挥的方法

1、使用前:必须灭活处理,56℃30分钟。对于一些品质高的胎牛血清和新牛血清可以考虑不经灭活直接用于细胞培养。

2、储存条件:一般储存于-20℃,同时应避免反复冻融。购买大包装的血清后,首先要灭活处理,然后分装成小包装,储存于-20℃,使用前融化。融化时现置于4℃。融化后的血清在4℃不宜长时间存放,应尽快使用。

3、使用浓度:自从有了合成培养基,血清就是作为一种添加成分与合成培养基混合使用,使用浓度一般为5-20%,*常用是10%。过多血清容易使培养中的细胞发生变化,特别是一些二倍体的无限细胞系,迅速生长之后容易发生恶性转化。

采购血清时,先从供应商处索取样品进行试验,选定一批后就要保留足够使用6个月至1年的量,直至用另一批经过预先试验的样品代替。




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